方法:采用稳定表达VPAC1受体的CHO-K1细胞(CHO-K1/VPAC1细胞)从12肽噬菌体肽库中筛选出与VPAC1结合的肽。对随机选取的噬菌体克隆进行DNA测序和同源性分析。采用细胞ELISA法确定最具选择性结合的肽以作进一步研究。通过竞争抑制ELISA和流式细胞术分析其与VPAC1受体的结合特异性。利用荧光显微镜和流式细胞术确认所选肽与CHO-K1/VPAC1细胞和结直肠癌(CRC)细胞系的结合能力。
结果:经过四轮淘选后,获得了大量特异性结合CHO-K1/VPAC1细胞的噬菌体。在所选的噬菌体克隆中,60个中有16个具有相同的肽序列GFRFGALHEYNS,文章将其命名为VP2肽。VP2与血管活性肠肽(VIP)竞争性结合VPAC1受体。更重要的是,文章证实了VP2特异性结合CHO-K1/VPAC1细胞以及几种结肠直肠癌细胞系。
名称:VP2
单字母 H2N-GFRFGALHEYNS-OH
多字母 H2N-Gly-Phe-Arg-Phe-Gly-Ala-Leu-His-Glu-Tyr-Asn-Ser-OH
氨基酸个数 12
分子式 C64H88N18O18
平均分子量(MW) 1397.49
结论:文章的研究结果表明,VP2 肽能够特异性地与 VPAC1 受体以及几种结直肠癌细胞系结合。并且,VP2 肽可能是开发为一种有用的分子成像探针,用于早期检测结直肠癌的潜在候选物。
参考文献:doi.org/10.1371/journal.pone.0054264